限制酶 编辑
限制酶又称限制内切酶或限制性内切酶,全称限制性内切核酸酶,是一种能将双股DNA切开的。它的切割方法是将糖类分子与磷酸之间的键结切断,进而于两条DNA链上各产生一个切口,且不破坏核苷酸碱基。切割形式有两种,分别是可产生具有突出单股DNA的黏状末端,以及末端平整无凸起的平滑末端。由于断开的DNA片段可由另一种称为DNA连接酶的酶黏合,因此染色体或DNA上不同的限片段,得以经由剪接作用而结合在一起。
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核酸内切酶在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等分解DNA的酶;RNase、RNaseT1等分解RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。其中的限制内切酶又称限制酶,可切割特定的DNA位置。
TaqI是一种1978年发现于细菌水生栖热菌的II型限制酶,其识别序列为
基因泰克公司,全名基因工程科技公司,是一家生物科技股份有限公司,由创投人罗伯特·史旺森与生物化学家赫伯特·博耶博士于1976年成立,这件事也被视为是生物科技产业的起点。身为重组DNA先驱的博耶,于1973年与他的同僚史坦利·诺曼·科恩展示了把限制酶当作“剪刀”剪下重要的DNA片段之后,黏合回以同一个限制酶剪过的质粒载体的技术。虽然科恩回到了学界,史旺森却连络了博耶并创立了这个公司。博耶与贝克曼研究院的亚瑟·里格斯、板仓启壹合作,于1977年成功在细菌体内做出人类基因的基因表现并生产出体抑素。接着戴维·戈德尔与丹尼斯·克莱德加入了这个团队,一起于1978年成功制造出胰岛素。其前首席科学家陈奕雄博士,于90年代参与美国政府主导的人类基因体计划,开发出ABI 3700全自动高速定序仪,让美国政府得以在2001年宣布完成人类基因定序草图,也为日后发展蓬勃的基因检测技术奠定了重要的基础。罗氏药厂于2009年3月26日以大约468亿美元完成了基因泰克的收购,并完全拥有此公司。
基因泰克公司,全名基因工程科技公司,是一家生物科技股份有限公司,由创投人罗伯特·史旺森与生物化学家赫伯特·博耶博士于1976年成立,这件事也被视为是生物科技产业的起点。身为重组DNA先驱的博耶,于1973年与他的同僚史坦利·诺曼·科恩展示了把限制酶当作“剪刀”剪下重要的DNA片段之后,黏合回以同一个限制酶剪过的质粒载体的技术。虽然科恩回到了学界,史旺森却连络了博耶并创立了这个公司。博耶与贝克曼研究院的亚瑟·里格斯、板仓启壹合作,于1977年成功在细菌体内做出人类基因的基因表现并生产出体抑素。接着戴维·戈德尔与丹尼斯·克莱德加入了这个团队,一起于1978年成功制造出胰岛素。其前首席科学家陈奕雄博士,于90年代参与美国政府主导的人类基因体计划,开发出ABI 3700全自动高速定序仪,让美国政府得以在2001年宣布完成人类基因定序草图,也为日后发展蓬勃的基因检测技术奠定了重要的基础。罗氏药厂于2009年3月26日以大约468亿美元完成了基因泰克的收购,并完全拥有此公司。
DpnII是一种发现于细菌肺炎链球菌的II型限制酶,其识别序列为
Alu元件是人类基因组中一组散在分布的相关序列,每个长约300bp。单个成员的每个末端上有Alu限制酶的切割位点,并由此命名。在灵长类的基因组中存在着大量不同种类的Alu元件。事实上,Alu元件是人类基因组中丰度最高的转座元件。它们源于小胞质7SL RNA,后者是信号识别颗粒的成分之一。灵长总目祖先的基因组中发生了7SL RNA成为Alu元件前体的事件。
限制修饰系统是一种存在于细菌和其他原核生物中,可防御外源DNA,例如噬菌体携带的DNA的侵入。有些细菌体内含有限制酶,可将双股DNA切断,之后其他的内切酶再将切下的片段降解,因此能将入侵的外来DNA摧毁。
所谓黏性末端或黏状末端,指DNA重组技术中,DNA限制酶在切开脱氧核糖核酸的双链结构时,形成的突出末端,与平末端相对。平末端则是上述切割过程中不突出的末端,所以DNA重组时操作难度稍大于黏性末端。
核酸内切酶在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等分解DNA的酶;RNase、RNaseT1等分解RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。其中的限制内切酶又称限制酶,可切割特定的DNA位置。
XhoI是一种发现于黄单胞菌属细菌的II型限制酶,其识别序列为